细胞工程实验总结 本文关键词：细胞，实验，工程
细胞工程实验总结 本文简介：实验一、细胞培养实验器材和试剂的准备1、哪些物品适合于高压灭菌，并说明理由。①材料：微孔滤膜(直径25cm)：孔径为0.22μm、微孔滤膜(直径90cm)：孔径为0.22μm、过滤器(直径25cm)。②仪器和器材：眼科剪刀和镊子、长镊子、培养皿、培养瓶、试剂瓶（或盐水瓶）、移液枪、10毫升试管、10
细胞工程实验总结 本文内容：
实验一、细胞培养实验器材和试剂的准备
1、哪些物品适合于高压灭菌，并说明理由。
①材料：微孔滤膜(直径25
cm)：孔径为0.22μm、微孔滤膜(直径90
cm)：孔径为0.22
μm、过滤器(直径25
cm)。
②仪器和器材：眼科剪刀和镊子、长镊子、培养皿、培养瓶、试剂瓶（或盐水瓶）、移液枪、10毫升试管、10毫升离心管、巴氏吸管、5毫升（或10毫升）吸量管、不锈钢过滤器、塑料过滤器、注射器、超净工作台、干燥箱、高压灭菌锅、正压泵。
理由：适合于高压灭菌是布类、橡胶制品(如胶塞)、金属器械、玻璃器皿、某些耐高温的塑料制品以及加热后不发生沉淀的无机溶液(如Hanks液、PBS等)。
2、细胞培养常用液体如何配制和灭菌？
1）PBS
：8.0g
NaCl、0.2gKCl、2.2gNa2HPO4、0.12gKH2PO4溶于1000
mL双蒸水，高压灭菌，4℃保存。（准备试剂瓶）灭菌方法：
高压灭菌。
2）干粉培养基过滤除菌
（先准备好不锈钢过滤器及滤膜，安装后高压灭菌，适度烘干；铝盒4个，三角瓶2个，容量瓶，不锈钢过滤器一套，酒精灯，酒精棉球3瓶，吸耳球3个，吸量管10毫升和5毫升各5根，分装用瓶，血清，超纯水，抗生素）
认真阅读说明书。说明书都注明干粉不包含的成分，常见的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。这些成分有些是必须添加的，如NaHCO3、谷氨酰胺，有些根据实验需要决定。
配制方法（1L）：1）在一个尽可能接近总体积的容器中加入大约500mL双蒸水。
2）在室温（20℃到30℃）的水中加入干粉培养基。
3）水洗袋内残留培养基，全部转移到容器内，轻轻搅拌，不要加热。
4）完全溶解之后，1袋1L粉状DMEM加3.7g
NaHCO3，1mmoL∕L丙酮酸钠，即0.11g/L，添加双抗。
5）用双蒸水定容到1L，搅拌溶解。注意不要过分搅拌。
6）通过缓慢搅拌加入1N
NaOH
或1N
HCL调节pH值培养基在过滤前要保持密封。
7）立刻不锈钢过滤器过滤除菌，贴上标签，4℃保存备用。
灭菌方法：
高压灭菌。
3）胰蛋白酶-EDTA消化液
①胰蛋白酶溶液配制：称取胰蛋白酶（1:250）粉末0.25g置烧杯中，溶于100mL
PBS，搅拌混匀，置室温4
小时并不断搅拌振荡，过滤除菌。（若配制400
mL则应称取1g胰蛋白酶）
灭菌方法：过滤除菌。
②EDTA
溶液配制：0.2g
EDTA用400mL
PBS溶解后，高压蒸汽灭菌，分装成小瓶，
4℃冰箱保存。
灭菌方法：高压蒸汽灭菌。
胰蛋白酶与EDTA
按1：1混合后分装，4℃冰箱保存。
4）抗生素液
双抗（青霉素、链霉素）各1克，溶于100mL纯水，过滤除菌，分装，4℃冰箱保存。使用前1：100稀释。
灭菌方法：过滤除菌。
3、简单介绍动物细胞培养实验室常用仪器的操作方法及注意事项。
操作方法：
2清洗1）新玻璃器皿的清洗2）使用过的玻璃器皿的清洗3）胶塞的处理
3
消毒1）物理消毒法
(2)干热灭菌
(4)
过滤除菌
（5）煮沸消毒
急2）化学消毒法
常用的消毒液有如下几种：
(1)
70％(或75％)酒精
(2)
0.1％新洁尔灭(3)
来苏儿水(煤酚皂溶液)
(4)
0.5%过氧乙酸(5)
乳酸蒸气
(6)
37%甲醛加高锰酸钾
(7)甲醛消毒方法
注意事项
1、清洗玻璃制品时，浸酸之后一定要用自来水冲洗10-15次。清洗塑料制品时要用棉花或柔软纱布擦洗。枪头和试管一定要用超声清洗处理后逐个清洗。
2、干热灭菌时，应在白天使用烤箱，并不断观察，以免发生意外。当温度超过100℃时，不能再打开烤箱门。器皿烤完后，待温度降至100℃之下才能开烤箱门。金属器械和橡胶、塑料制品不能使用干热灭菌方法。
3、高压灭菌后器皿务必晾干或烘干。
4、牛血清、大部分培养基、胰酶和一些生物制剂均不能高压。需要长期保存的血清必须储存于-20℃—-80℃
低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。血清在冻入低温冰箱前，不要装得太满，必须预留一定体积空间，（其他溶液冻存也是如此）。一般厂商提供的血清无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物，则可将血清加入培养液内一起过滤。血清解冻需采用逐步解冻法，切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀，使温度与成分均一，待全部溶解后再分装。
5、滤过除菌时，滤器在使用前先装好滤膜，包好，经高压灭菌后才能使用。过滤前可用压进空气的办法测试过滤器是否完好，去除压力后针筒会反弹即为完好无损。滤过酶类制剂时应待滤器温度降至室温下再进行。过滤时压力不宜过。装滤膜时位置要准确。另外滤器包装时，螺钉不要拧得太紧待高压灭菌之后，再拧紧使用。
6、使用化学消毒法时，配制75%酒精应用卫生级，不要用化学纯、分析纯和优质纯酒精。来苏儿水不能用于皮肤消毒。空气消毒时，所有的物品要事先准备齐全并使消毒者有较方便的退出途径。
7、培养基过滤器过滤除菌注意事项：
(1)
细胞培养用水一般为三蒸水或超纯水，医药生产上一般为注射用水。
(2)
建议尽量选择与所用量相匹配的包装一次使用。
(3)
溶解干粉培养基时先加入终体积90%－95%的培养用水，添加剂加完后再定容。
(4)
如需添加的组分较多时，某一组分完全溶解后，再添加另一组分。
(5)
待培养基完全溶解后再加入碳酸氢钠。
(6)
所有成分完全溶解后，培养基应立即过滤或高压除菌。
(7)在过滤前，可将pH调至比所需值低0.1-0.2个单位。
(8)
在细胞培养过程中，建议不加或加少量的抗生素，如血清的浓度较低则所加抗生素的量也要相应降低一些。
(9)
建议用1N
HCl或1N
NaOH来调节培养基的pH。
8、物品放进饭盒后要贴好标签，还需要用棉布或牛皮纸包好再贴上标签。在标签处包扎好。容器，包括装PBS的玻璃瓶，瓶口要拧松，不能紧，瓶口包扎牛皮纸，灭菌后立刻拧紧瓶盖，然后再取出，冷却后放入冰箱。注意检测标签是否脱落。
9、根据每个实验的要求，准备好所需物品，一并放入超净台内。实验器材准备的数量要大于实际使用数，瓶盖要大于瓶数。要配备至少三套器械（一套使用，一套备用，一套清洗灭菌），循环使用。
10、玻璃瓶、移液管要封闭包扎使用端，标记手持端。
实验二
鸡胚胎成纤维细胞的原代培养
1、如何进行鸡胚胎成纤维细胞的原代培养。
实验进行前，准备好相关器材，无菌室及超净工作台以紫外灯照射灭菌30-60
分钟（溶液同时37℃预热），然后开启通风10
分钟后，才开始实验操作。实验用品以75%
酒精擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域酒精灯火焰旁进行。
1、取9-10日龄的鸡胚，用酒精消毒，在超净工作台内，小心取出鸡胚，放在无菌培养皿中，除去头尾、四肢及内脏；
2、胚体用含双抗PBS冲洗2-3次，切成1-2mm3的小块，然后转入容积适量大小的离心管；
3、按每个鸡胚加入大约5mL的胰酶消化液，在室温（或37℃）下消化10
min，吸管（或枪头）不停吹打；
4、加入含小牛血清培养液终止消化，收集细胞悬液，没有消化完全的组织块可再消化一次；
5、收集到的细胞悬液经100目过滤筛过滤，1200转离心5
min；离心管用酒精擦拭后拿进超净台，拧开盖子后，管口过火焰两次，倒出上清，保存管口向下蘸一下干的酒精棉球，再保存管口向下过火焰两次；
6、细胞沉淀用含10%小牛血清的DMEM培养液重新悬浮；
7、以5×105个/mL的密度溶液3.4ml接种到培养瓶中（大约20-30mL细胞液/鸡胚0.6ml），观察细胞形态（绘图），将瓶盖微松，于37℃、5%
CO2浓度、饱和湿度条件下培养。
8、经过1天的培养。
2、原代培养时如何从组织分离细胞?
收集到的细胞悬液经100目过滤筛过滤，1200转离心5
min；离心管用酒精擦拭后拿进超净台，拧开盖子后，管口过火焰两次，倒出上清，保存管口向下蘸一下干的酒精棉球，再保存管口向下过火焰两次；
6、细胞沉淀用含10%小牛血清的DMEM培养液重新悬浮；
3、绘图展示自己的实验结果、谈谈你的实验感想。
实验三：培养细胞的形态观察及活率检测
1简述培养细胞的形态观察方法及注意事项。
(一)培养细胞的形态观察
1、将细胞培养瓶从二氧化碳培养箱中取出，注意观察细胞培养液的颜色和清澈度。然后，将细胞培养瓶平稳地放在倒置显微镜载物台上，此时应注意不要将瓶翻转，也不要让瓶内的液体接触瓶塞或流出瓶口。
2、打开倒置镜光源，通过双筒目镜将视野调到合适的亮度。
3、调节载物台的高度进行对焦，在看到细胞层之后，再用细调节器将物像调清楚，注意观察细胞的轮廓、形状和内部结构。在观察时，最经常使用的是20X物镜（绘图）。
(二)
观察细胞体外培养状况
细胞培养24h后，即可进行观察，观察的重点如下：
A．首先要观察培养细胞是否污染（观察阳性对照样品）。主要观察培养液颜色的变化及混浊度。
B．观察培养基颜色变化及细胞是否生长。
C．如细胞已生长，则要观察细胞的形态特征并判断其所处的生长阶段。
D．观察完毕，可用台盼蓝染液对细胞进行染色。以确定死、活细胞的比例。
2、简述台盼兰染色和伊红染色检测细胞活率的原理及操作方法。
台盼兰染色原理：
由于培养基内有pH指示剂的存在，因此它的颜色往往可以间接地表明细胞的生长状态。呈橙黄色时，细胞一般生长状态较好；呈淡黄色时，则可能是培养时问过长，营养不足，死亡细胞过多；如呈紫红色，则可能是细胞生长状态不好，或已死亡。实际上，一种细胞在培养中的形态并不是永恒不变的，它随营养、pH、生长周期而改变，但在比较稳定的条件下形态基本是一致的。在贴壁细胞培养中，镜下折光率高，圆而发亮的一般被认为是分裂期细胞。
伊红染色检测细胞活率的原理：
贴壁细胞在生长状态良好时，细胞内颗粒少，看不到有空泡，细胞边缘清楚，培养基内看不到悬浮的细胞和碎片，培养液清澈透明，而当细胞内颗粒较多，透明差，空泡多时，表明生长较差。当瓶内培养基混浊时，应想到细菌真菌污染的可能。
操作方法：
（四）台盼兰染色
1）
配制0.2％(W/V)台盼兰水溶液（溶于PBS，加热使之完全溶解，用滤纸或纱布过滤除渣，装入瓶内室温保存），及4.25
%(W/V)
Nacl溶液；
2）
测定前，取4份0.2％台盼兰与1份盐水混合；
3）
取台盼兰溶液，另入到等量细胞悬中(细胞浓度2-5×106细胞/
mL)混匀；
4）
将细胞悬液加入血球计数板中，使液体自然充满计数板小室。注意不要使小室内有气泡产生，否则要重新滴加。分别计数末染色的细胞数(活细胞)及染色的(死细胞)细胞数。细胞计数200个以上，（绘图）。
5）计算细胞活率：活细胞数/（活细胞数+死细胞数）×100
%。
（五）伊红Y染色
1）
配制0.2％(W/V，溶于PBS)伊红Y水溶液；2）
取0.1mL细胞液悬(细胞浓度2-5×106细胞/
mL)，加入等量伊红Y溶液混匀；3）2
min后将细胞悬液加入血球计数板中，镜检、计数。死细胞染成桃红色，活细胞不着色（绘图）。细胞计数200个以上。，（绘图）
4）计算细胞活率：活细胞数/（活细胞数+死细胞数）×100％。
3、绘图展示自己的实验结果、谈谈你的实验感想。
放大的计数室
按下式进行细胞浓度的计数：
注①
4大格中的每一大格体积为0.1mm3。1mL=l，0000大格，因此，1大格细胞数×104=细胞数／mL。注②
染色标本在15分钟内检查计数，因为台盼兰染液可以迅速地使死细胞染上蓝色，延长时间活细胞也将着色，用此方法来分辨死活细胞。
进行细胞计数时应力求准确，因此，在科学研究中，往往将计数板的两侧都滴加上细胞悬液，并同时滴加几块计数板(或反复滴加一块计数板几次)，最后取结果的平均值。
实验四：鸡胚胎成纤维细胞的传代培养
1、简述细胞传代培养的操作程序及注意事项。
在做传代细胞培养之前，首先将培养瓶置于显微镜下，观察原代培养的细胞是否铺满培养瓶底部（绘图），如已长成单层，即可进行细胞的传代培养。
1、完全培养基配制:DMEM液
90％；小牛血清
10％；双抗(1万单位／mL)
加至约100单位／mL；
2、取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内；
3、从培养箱内取出细胞，取出细胞时要旋紧瓶盖，再在镜下观察细胞。用酒精棉球擦拭后放入超净台内；
4、在酒精灯旁打开瓶塞，在酒精灯上烧口消毒，吸出原培养液，然后用PBS清洗细胞2次，尽量除去残余的血清；
5、25
mL培养瓶中加入0.2
mL的消化液进行消化，以盖满细胞为宜，置于室温或放置于培养箱内，停留1-2min后，不停摇晃培养瓶。消化程度可在倒置显微镜下观察，一般以细胞突起缩回、细胞间间隙增大、细胞近乎缩成圆形，细胞之间不再连接成片为度；
6、吸出消化液，加入适量的含小牛血清的培养液，反复轻轻吹打培养瓶底部，使经消化的细胞脱离瓶底并分散为单个细胞；
7、收集细胞悬液，1200-1500转离心5
min，去上清；
8、用培养液重新悬浮细胞并计算细胞活率和密度，以5×105个/mL密度（1：3）接种到培养瓶中，在瓶侧壁做好标记；
8、在倒置显微镜下观察培养瓶内的细胞形态和细胞浓度；适当旋松瓶盖，于37℃、5%
CO2浓度、饱和湿度条件下培养；
9、4小时后及第二天观察细胞生长情况。
图4-2
贴壁培养细胞的消化与传代培养操作流程
五、注意事项
1、严格无菌操作，作并防止细胞之间的交叉污染。所有操作要尽量靠近酒精灯火焰。每次最好只进行一种细胞的操作。每一种细胞使用一套器材。培养用液应严格分开，不同液体不要共用吸管。2、所有溶液最好37℃预热。3、掌握好消化程度。4、正确摆放使用的用具，保证足够的操作空间，不仅便于操作而且可减少污染。
2、细胞传代培养获得成功的关键要素是什么?
①在做传代细胞培养之前，将培养瓶置于显微镜下，观察培养瓶中细胞是否已长成致密单层，如已长成单层，才能进行传代培养。
②传代培养的细胞需逐日进行观察，注意细胞有无污染，培养液颜色的变化及细胞生长的情况。
3、绘图展示自己的实验结果、谈谈你的实验感想。
实验二
鸡胚胎成纤维细胞的原代培养
（大约20-30mL细胞液/鸡胚），观察细胞形态（绘图），
实验三：培养细胞的形态观察及活率检测
在观察时，最经常使用的是20X物镜（绘图）。
（观察阳性对照样品，（绘图））。细胞计数200个以上，（绘图）。
活细胞不着色，（绘图）。细胞计数200个以上。
实验四：鸡胚胎成纤维细胞的传代培养
观察原代培养的细胞是否铺满培养瓶底部（绘图），
8、在倒置显微镜下观察培养瓶内的细胞形态和细胞浓度（绘图）；
9、4小时后及第二天观察细胞生长情况（绘图）。
图4-2
贴壁培养细胞的消化与传代培养操作流程
啤酒发酵实验
实验目的：
1.
学习酵母菌种的扩大培养方法，为实验室啤酒发酵准备菌种。
实验原理：1在进行啤酒发酵之前，必须准备好足够量的发酵菌种。在啤酒发酵中，接种量一般应为麦芽汁量的10%，因此，要进行大规模的发酵，首先必须进行酵母菌种的扩大培养。扩大培养的目的一方面是获得足量的酵母，另一方面是使酵母由最适生长温度（28℃）逐步适应为发酵温度（10℃）。
.2啤酒酿造包括麦芽粉碎、麦汁糖化、麦醪过滤、麦汁煮沸、麦汁冷却及啤酒发酵等几个过程。啤酒发酵是纯种发酵，必须先对空的发酵罐进行灭菌处理。
3.麦汁制备包括原料糖化、麦醪过滤和麦汁煮沸等几个过程。由于麦芽的价格相对较高，再加上发酵过程中需要较多的糖，
实验器材：恒温培养箱，生化培养箱，显微镜、粉碎机、糖化煮沸锅、过滤沉淀槽、发酵罐、制冷机、板式换热器、糊化锅、糖化锅、麦汁过滤槽和麦汁煮沸锅、带冷却装置的发酵罐（50L，100L）、。
实验步骤：
一.啤酒酵母的扩大培养
28℃，2天
菌种扩大:
麦汁斜面菌种→麦汁平板——→镜检，挑单菌落3个，接种
50mL麦汁试管（或三角瓶）—20℃，2天→550mL麦汁三角瓶—15℃，2天→计数备用。
每天摇动3次
每天摇动3次
1
培养基的制备
取协定法制备的麦芽汁滤液（约400
mL），加水定容至约600
mL，取50
mL装入250
mL三角瓶中，另550
mL至1000
mL三角瓶中，包上瓶口布后，0.05
Mpa灭菌30分钟。
2
菌种扩大培养
按上面流程进行菌种的扩大培养（斜面活化菌种由教师提供）。注意无菌操作。
五、注意事项：灭菌后的培养基会有不少沉淀，这不影响酵母菌的繁殖。若要减少沉淀，可在灭菌前将培养基充分煮沸并过滤。
二、小型啤酒酿造设备介绍及发酵罐的空消
1.
熟悉各项设备；
清洗各项设备；
在回旋沉淀槽、板式换热器、发酵罐中通入蒸汽，消毒30分钟。
待各项设备使用结束后，应及时进行清洗灭菌。
三、麦芽汁的制备
1.麦芽粉碎
用谷物粉碎机粉碎，使粗细比例控制在1：2.5，同时使表皮破而不碎。必要时可稍稍回潮后在粉碎。
2.糖化
采用浸出糖化法
实验台称600g麦芽加入3000ml水，分入四个烧杯中于水浴锅上加热，使水浴锅中的液面高于烧杯中的液面。
糖化流程：35~37℃，保温30min→50~52
℃
60min→65
℃30min（碘液反应完全）
→76~78
℃送入漏斗中进行过滤。
3.麦汁过滤：
用4~6层纱布进行过滤，前1L滤液收集返回漏斗中重新过滤，其余正常过滤。
把糟用2L的70度的水
冲洗出来，充分利用原料。
（过滤目的：尽快把麦汁和麦槽分开，以得到清凉和较高收率的麦汁，避免影响半成品麦芽汁的色香味。）
4.麦汁煮沸：
收集全部滤液，加热煮沸后加入5g酒花，继续煮沸1~1.5h。其间要经常搅拌。
停火后，沿着锅壁顺着一个方向搅拌，锅底中间会出现沉淀物。静置，把热麦汁趁热缓缓倒入灭过菌的封口容器（大的带盖子的），尽量减少沉淀物进入。
目的：通常采用传统的间歇常压煮沸法。煮沸时间一般为70-90分钟。）
5.麦汁冷却。
在麦汁冷却到室温后加入啤酒酵母，这个过程容易染菌，须在酒精灯火焰保护下加入
6.设备清洗
由于麦芽汁营养丰富，各项设备及管阀件（包括糖化煮沸锅、过滤槽、回旋沉淀槽及板式换热器）使用完毕后，应及时用洗涤液和清水清洗，并蒸汽杀菌。
7.主发酵
10
℃发酵5~6d。发酵结束制成嫩啤酒。观察主发酵过程中的变化，并且做好实验记录。
8.后发酵
装瓶后置于冰箱中发酵7d。
实验结果
9
篇2：细胞生物学设计性实验：细胞核的分离鉴定
细胞生物学设计性实验：细胞核的分离鉴定 本文关键词：细胞核，细胞生物学，鉴定，分离，实验
细胞生物学设计性实验：细胞核的分离鉴定 本文简介：医学细胞生物学设计型实验设计报告班级10级k-7班评分实验项目：细胞核的分离与鉴定实验原理：1、细胞内各种结构的比重和大小不同，在同一离心场内其沉降速度也不同。所以，用差速离心法可将细胞内各种细胞器及组分分级分离出来。差速离心法也是用来研究亚细胞成分的化学组成，理化特性及其功能的主要手段。2、分离细
细胞生物学设计性实验：细胞核的分离鉴定 本文内容：
医学细胞生物学设计型实验设计报告
班级10级k-7班
评分
实验项目：
细胞核的分离与鉴定
实验原理：1、细胞内各种结构的比重和大小不同，在同一离心场内其沉降速度也不同。所以，用差速离心法可将细胞内各种细胞器及组分分级分离出来。差速离心法也是用来研究亚细胞成分的化学组成，理化特性及其功能的主要手段。
2、分离细胞核最常用的方法是将组织制成匀浆，在特定的条件下进行离心分离，然后分析鉴定。
3、匀浆是指在低温条件下，将组织放入匀浆器，加入等渗匀浆介质进行研磨，破碎细胞，使之成为各种细胞器及其包含物的匀浆液。
实验步骤：1、处死：断头处死小白鼠，手提尾部使其学业尽量流出。
2、取材：迅速开腹取肝，在盛有生理盐水的小烧杯中反复洗涤，称取湿重约为1g的肝组织放在烧杯中。
3、匀浆：加油8ml预冷的0.25mol/L蔗糖0.003mol/L绿化高永夜于烧杯中，尽量剪碎肝组织，将剪碎的刚组织倒入玻璃匀浆器，是匀浆器下端侵入盛有冰块的器皿（如冰盘）。左手握持匀浆器，右手将匀浆捣杆垂直插入管中匀浆，直至看不到明显的组织块。
4、过滤：
用8层纱布（先用少量生理盐水或蔗糖液润湿纱布）过滤匀浆液于离心管中。
5、离心：在天平上平衡每对离心管，2500r/min离心15min，取上清液于另一离心管中。
6、涂片：取上清液制一张涂片（涂片1）。将原离心管中剩余上清液吹打成沉淀成悬液，另制一张涂片（涂片2），自然干燥
。
7
、染色：分别在涂片1和2上低价甲苯胺蓝染液
，染色5到7分钟（即滴染）。
8、洗涤：冲去染液，晾干。
9、镜检：结合实验结果的描述，镜下观察分析。
注意事项：1.操作规范，防止试剂污染。
2.细胞悬液的涂片制作要轻柔。
3.使用离心机要注意平衡，转速从低到高。
预期结果：低倍镜下找到标本，再换高倍镜，可见肝细胞核已游离出来，被染成蓝紫色，圆形，中央有2到4个甚至更多个深蓝色的核仁。
实验用品：材料：小白鼠肝脏。
试剂：生理盐水、0.25mol/L蔗糖0.003mol/L氯化钙溶液、1%甲苯胺兰染液。
仪器设备：显微镜、普通离心机、天平、离心管、滴管、玻璃漏斗、量筒、25ml烧杯、解剖剪、镊子、冲洗瓶、纱布、伯乐匀浆器、载玻片、盖玻片、染色盘架。
设计组名单：
姓
名
学
号
姜
俊
1020150738
曾
祥
兵
1020150739
冯
国
周
1020150744
黄
丹
阳
1020150750
杜
徉
睿
1020150751
教师：
日期：
篇3：必修部分章末质量检测生命活动的基本单位细胞
必修部分章末质量检测生命活动的基本单位细胞 本文关键词：必修，质量检测，细胞，基本单位，生命
必修部分章末质量检测生命活动的基本单位细胞 本文简介：591UP有效学习平台(www.jsfw8.com)第二章生命活动的基本单位细胞(时间90分钟，满分100分)一、选择题(本题包括20个小题，每小题2.5分，共50分)1.下列有关细胞的叙述不正确的是()A.所有由细胞构成的生物都以DNA作为遗传物质B.组成同一个体的细胞含有完全相同的基因，所含酶的
必修部分章末质量检测生命活动的基本单位细胞 本文内容：
591UP有效学习平台(www.jsfw8.com)
第二章
生命活动的基本单位
细胞
(时间90分钟，满分100分)
一、选择题(本题包括20个小题，每小题2.5分，共50分)
1.下列有关细胞的叙述不正确的是
(
)
A.所有由细胞构成的生物都以DNA作为遗传物质
B.组成同一个体的细胞含有完全相同的基因，所含酶的种类也完全相同
C.细胞分化的实质是细胞内基因选择性表达的过程，而细胞的癌变则是细胞畸形分化的结果
D.在生物体内，细胞的分化是一个持久性、不可逆的过程，在胚胎时期达到最高程度
解析：组成同一个体的所有细胞都是由受精卵一个细胞分裂分化而来，因此含有完全相同的基因，但是在细胞分化过程中，由于基因选择性的表达，导致不同的细胞中酶的种类不完全相同。
答案：B
2.麻风病是由麻风杆菌引起的一种慢性接触性传染病，下列有关麻风杆菌的叙述中正确的是
(
)
①没有由核膜包围的细胞核
②形成ATP的场所有线粒体和细胞质基质
③遗传物质是RNA
④遗传物质DNA只分布在拟核中
⑤可遗传变异的来源有基因重组、基因突变和染色体变异
A.①③④
B.②⑤
C.②④
D.①
解析：麻风杆菌属原核细胞，不具线粒体，其遗传物质DNA分布于拟核及质粒中，可遗传变异只来自基因突变。
答案：D
3.(2010·福州质检)用高倍显微镜观察一个正常生活的细胞，发现没有叶绿体，则该细胞(
)
A.一定不是植物细胞
B.一定不能进行光合作用
C.一定能进行同化作用
D.一定能进行有氧呼吸
解析：叶绿体主要分布在叶肉细胞中，并非所有的植物体细胞中，如根中就无叶绿体；蓝藻没有叶绿体，但可以进行光合作用；只要细胞活着，就时刻进行新陈代谢，时刻进行着同化作用和异化作用；有些生物进行有氧呼吸，有些进行无氧呼吸。
答案：C
4.细胞内各细胞器具有一定的结构和功能，
对图中结构①的叙述，正确的是
(
)
A.在不同植物细胞内其数量基本相同
B.是植物合成蛋白质的主要细胞器
C.是植物进行光合作用产生有机物的细胞器
D.含有DNA和RNA，是细胞遗传特性的控制中心
解析：叶绿体主要存在于绿色植物的绿色器官的细胞内，不同植物细胞内数量是不同的；叶绿体是进行光合作用的细胞器；叶绿体中含有少量DNA和RNA，其DNA中遗传信息控制的生物性状的遗传属于细胞质遗传；细胞核是细胞遗传特性的控制中心。
答案：C
5.用32P标记磷脂中的磷，在下列哪组细胞器中不能检测到32P的存在
(
)
A.线粒体和叶绿体
B.内质网和高尔基体
C.线粒体和高尔基体
D.核糖体和中心体
解析：含“磷脂”的细胞器即“具生物膜”的细胞器，故标记磷脂后，在不具生物膜的核糖体和中心体中不能检测到32P。
答案：D
6.甲(○)乙(●)两种物质在细胞膜两侧的分布
情况如图(颗粒的多少表示浓度的高低)，
下列说法正确的是
(
)
A.甲进入细胞一定需要能量
B.甲运出细胞一定不需要能量
C.乙进入细胞一定有载体蛋白的参与
D.乙运出细胞一定有载体蛋白的参与
解析：甲运出和乙进入细胞都是从低浓度到高浓度，属于主动运输，需要载体蛋白和能量的参与；乙运出和甲进入细胞都是从高浓度到低浓度，不一定需要载体蛋白和能量的参与。
答案：C
7.将用3H标记的尿苷(可构成核糖核苷酸)引入某绿色植物细胞内，然后设法获得各种结构，下列结构最有可能表现出放射性的是
(
)
A.细胞核、核仁和中心体
B.细胞核、核糖体和高尔基体
C.细胞核、核糖体、线粒体和叶绿体
D.细胞核、核糖体、内质网和液泡
解析：尿苷可构成核糖核苷酸，只存于RNA中；细胞核、核糖体、线粒体和叶绿体等结构中含有RNA，中心体、高尔基体、内质网和液泡等细胞器中则没有RNA。
答案：C
8.(2010·崇文质检)经研究发现，从孕妇的羊水中提取的干细胞在实验室培养后形成了骨骼、血管、肌肉、神经以及肝脏等多种人体器官组织。以下有关叙述正确的是
(
)
A.此过程体现了细胞的全能性
B.神经细胞的分化程度比干细胞的分化程度低
C.提取的干细胞与其形成的肌肉细胞染色体组成不同
D.经培养后形成的多种人体组织细胞中mRNA存在差异
解析：干细胞增殖和分化过程中染色体组成不会发生改变；分化过程中，由于基因的选择性表达，产生不同的RNA；细胞的全能性是指高度分化的细胞发育成个体的潜能，该过程中没有发育成个体。
答案：D
9.胚胎干细胞是哺乳动物或人早期胚胎中的细胞，可以进一步分裂、分化成各种组织干细胞，再进一步分化成各种不同的组织。下列叙述不正确的是
(
)
A.各种组织干细胞分化形成不同组织细胞是基因选择性表达的结果
B.胚胎干细胞有细胞周期，神经干细胞分化形成的神经细胞没有细胞周期
C.造血干细胞分化形成红细胞、白细胞的过程是不可逆的
D.胚胎干细胞分化成肝脏细胞的过程表现了细胞的全能性
解析：细胞全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的能力。肝脏干细胞分化成肝脏细胞的过程体现了细胞的分裂、分化能力。
答案：D
10.在一个细胞周期(间、前、中、后、末期)中，下列现象最可能发生在同一时期的是
(
)
A.DNA复制和有关蛋白质的合成
B.染色体数加倍和染色单体形成
C.细胞板的出现和纺锤体的形成
D.着丝点的分裂和细胞质的分裂
解析：在间期主要变化是完成DNA的复制和有关蛋白质的合成，DNA复制的结果是形成了姐妹染色单体；前期形成了纺锤体；后期着丝点分裂，使染色体数目加倍；末期出现了细胞板，细胞质分裂。
答案：A
11.细菌繁殖中不可能发生的是
(
)
A.有丝分裂
B.
DNA复制
C.细胞壁形成
D.蛋白质合成
解析：细菌是原核生物，不能进行有丝分裂，只有真核生物才能进行有丝分裂，在细菌繁殖时，会发生DNA复制和蛋白质合成，以及细菌细胞壁的形成。
答案：A
12.若洋葱根尖分生区细胞中，由一个着丝点相连的两条染色单体所携带的基因不完全相同，其原因最可能是
(
)
A.发生了自由组合
B.发生过交叉互换
C.联会发生了紊乱
D.复制出现了差错
解析：洋葱根尖分生区细胞只进行有丝分裂，不进行联会，也不发生自由组合，其姐妹染色单体所携带的基因之所以不同，最可能的原因是复制发生了差错，即发生了基因突变。
答案：D
13.菠菜根的分生区细胞不断分裂使根向远处生长，在分裂过程中不会出现的是
(
)
A.细胞分裂间期，中心体的两个中心粒各自产生一个新的中心粒
B.细胞分裂中期，染色体形态较固定、数目较清晰
C.细胞分裂前期，核膜和核仁逐渐消失
D.细胞分裂末期，高尔基体参与细胞壁的形成
解析：菠菜属于高等植物，细胞中无中心体；细胞分裂前期核膜和核仁逐渐消失；中期染色体形态较固定、数目较清晰；末期，高尔基体参与细胞壁的形成。
答案：A
14.(2010·洛阳测试)下列关于二倍体高等植物细胞有丝分裂的叙述，正确的是
(
)
A.有线粒体、核糖体、中心体、高尔基体参与
B.需要解旋酶、RNA聚合酶、DNA聚合酶、DNA酶
C.同源染色体在细胞分裂间期进行复制
D.分裂后期的DNA分子数目和染色体数目都是前期的两倍
解析：高等植物细胞不含中心体；细胞分裂过程中有DNA的复制和蛋白质的合成，需解旋酶、RNA聚合酶、DNA聚合酶的参与，DNA酶是分解DNA的酶，有丝分裂过程与此无关；染色体在有丝分裂间期复制；有丝分裂后期的DNA与前、中期含量相同，染色体数是前、中期的二倍。
答案：C
15.下图表示的四种植物细胞的细胞周期(按顺时针方向)，其中说法正确的是
(
)
A.图中的bab表示细胞增殖过程的一个细胞周期
B.甲图的ba与丙图的ba所用的时间可能一样长
C.从ab，由于DNA的复制使染色体数目增加一倍
D.观察植物细胞有丝分裂的实验材料最好是选植物甲
解析：细胞周期包括分裂间期和分裂期，间期比分裂期的时间长得多，如按顺时针方向，细胞周期应表示为aba；扇形区域表示间期与分裂期的时间比，不表示绝对时间；间期DNA复制，染色体数目并不增加，两条姐妹染色单体共用一个着丝点；观察有丝分裂最好选择丁，因为分裂期时间相对较长，便于观察。
答案：B
16.下列过程不属于细胞分化的是
(
)
A.B淋巴细胞形成效应B细胞
B.胚胎干细胞形成神经细胞
C.植物细胞的质壁分离复原
D.蜥蜴断尾再生
解析：植物细胞质壁分离之后的复原过程是植物细胞吸水的一个生理过程，与细胞分化无关。蜥蜴断尾再生的过程既有细胞增殖同时又有细胞分化。B淋巴细胞形成效应B细胞以及胚胎干细胞形成神经细胞都属于细胞分化。
答案：C
17.下列关于细胞质流动的叙述中，错误的是
(
)
A.植物活细胞的细胞质有的能流动，有的不流动，所以实验时要选好材料
B.观察细胞质的流动，一般以细胞质中叶绿体的运动为标志
C.细胞质流动速度，在不同的温度等环境条件下有所不同
D.每个细胞中细胞质流动方向一般相同
解析：活细胞的细胞质都处于不断的流动状态。由于叶绿体呈绿色，体积大，易观察，所以一般用细胞质基质中叶绿体的运动作为细胞质流动的标志。细胞质的流动速度，随外界温度、光照、化学刺激及细胞损伤等条件发生变化，所以欲加快细胞质的流动，可采用适当升温、用光照射及切伤部分叶片等方法。在北半球植物体细胞质的流动方向绝大多数都沿逆时针方向，但在同一植物体内所有细胞中细胞质的流动方向都是相同的。
答案：A
18.如图是某同学在观察植物细胞有丝分裂
时观察到的一个图像，但是他没有找到
有丝分裂的各时期分裂图像，原因是
(
)
A.解离不充分
B.染色不充分
C.显微镜放大倍数太小
D.选取的视野位置不对
解析：图中所示为成熟区细胞，成熟区细胞不能进行有丝分裂，观察有丝分裂宜选择分生区细胞。
答案：D
19.(2010·青岛检测)下表是四种植物分生组织的细胞周期，有关叙述正确的是
(
)
植物
细胞周期的时间(h)
a时期
b时期
合计
物种1
10.6
0.4
11
物种2
18
0.5
18.5
物种3
16.5
2
18.5
物种4
10.4
2.3
12.7
A.四种分生组织都能产生吲哚乙酸，促进细胞进行有丝分裂
B.秋水仙素作用于b时期中的细胞，能使其染色体数目加倍
C.最好选用物种1观察有丝分裂过程，因其细胞周期最短
D.a时期在细胞核中进行转录和翻译，b时期可观察到染色体
解析：秋水仙素作用的时期是分裂前期，属于b时期；为观察到更多分裂期的细胞，应选择分裂期相对较长的物种4；翻译过程发生在细胞质中的核糖体上，不发生在细胞核中。
答案：B
20.下列有关细胞癌变和衰老的叙述，不正确的是
(
)
A.细胞癌变是正常细胞在致癌因子的作用下基因发生突变的结果
B.癌变和衰老的细胞其细胞形态、结构和功能均发生了变化
C.新陈代谢减慢和细胞膜的通透性改变是细胞衰老的特征
D.衰老的细胞内遗传物质发生了改变
解析：衰老细胞中遗传物质并未发生变化。
答案：D
二、非选择题(本题包括4个小题，共50分)
21.(12分)(2010·泰安调研)下图为真核细胞结构示意图，请据图回答下列问题：
(1)若用磷脂酶处理，其功能受到影响的细胞结构有(填序号)
；细胞核是遗传信息库，是细胞
的控制中心。
(2)在B细胞中，K＋是以
方式进入细胞，所需能量主要由[
]
提供。
(3)细胞器?内含多种水解酶，其功能是
。
(4)将A细胞浸泡在质量浓度为0.3
g/mL的蔗糖溶液中出现质壁分离，其原因是
。
(5)研究蛋白质合成与分泌常用的方法是
，
与细胞分泌蛋白的合成、加工和分泌直接有关的细胞结构依次是(填序号)
。
(6)A细胞能否进行旺盛的细胞分裂？并加以说明：
。
解析：(1)酶具有专一性，磷脂酶能催化磷脂分解，从而破坏细胞中生物膜结构，图中由生物膜构成的结构是②③④⑦⑨；细胞核是真核细胞贮存遗传物质的场所，控制着细胞代谢和遗传。(2)B细胞是动物细胞，K＋的吸收方式是主动运输，主动运输需要消耗能量，能量主要由线粒体提供。(3)图中?是溶酶体，内含多种水解酶，能够分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并杀死侵入细胞的病毒或病菌。(4)将成熟的植物活细胞放入到浓度为0.3
g/mL的蔗糖溶液中，由于细胞液浓度小于外界蔗糖溶液浓度，细胞失水而发生质壁分离现象。(5)研究蛋白质合成与分泌常用同位素示踪法，与分泌蛋白合成、加工和分泌直接有关的细胞结构依次是⑧核糖体、⑦内质网、⑨高尔基体和②细胞膜。(6)图中A细胞中已有大液泡，为成熟细胞，不能再进行分裂增殖。
答案：(1)②③④⑦⑨
代谢和遗传
(2)主动运输
③
线粒体
(3)分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并杀死侵入细胞的病毒或病菌
(4)液泡中细胞液的浓度小于0.3
g/mL的蔗糖溶液
(5)同位素示踪法
⑧⑦⑨②
(6)不能，该细胞已经高度分化，不再分裂
22.(10分)下图为某生物细胞分裂模式图，据图回答。
(1)图甲中含有同源染色体的区段是
。
(2)图乙为细胞
分裂
期示意图。该时期的主要特征是
。
(3)若②染色体的遗传信息来自父方，那么与之遗传信息完全相同的染色体为
，其遗传信息完全相同的原因是
。
(4)图乙对应于图甲中的
段，图丙对应于图甲中的
段。
答案：(1)ah
(2)有丝
后
染色体的着丝点分裂，染色单体分开并在纺锤丝的牵引下向细胞两极移动
(3)⑥
它们是由同一条染色体复制后分离形成的
(4)ef
ce
23.(12分)(2010·银川质检)下图表示干细胞的三个发育途径。据图回答下列问题：
(1)由A细胞形成的B细胞仍然保持着其
能力，A细胞到C细胞的过程是由
控制的。
(2)若D细胞是胰腺细胞，则结构⑦所起的作用是
。
(3)D细胞中
的基因与A细胞有所不同。
(4)若D细胞是正在衰老的细胞，该细胞中结构⑧发生的变化是
。
(5)由A细胞到形成多个卵细胞的过程，则经过了细胞的
分裂。
(6)用丙酮从D细胞中提取磷脂，在空气－水界面上铺展成单分子层，测得的单分子层面积是否大于D细胞表面积的2倍？
，理由是
。
解析：A细胞形成B细胞的过程是干细胞的自我复制，B细胞仍具有分裂和分化能力。细胞的凋亡是受遗传物质控制的。结构⑦是高尔基体，其作用是对蛋白质进行加工、转运。细胞分化的根本原因是基因选择性表达。⑧表示的是细胞核，细胞在衰老时细胞核体积增大、染色质固缩、染色加深。由A细胞到形成多个卵细胞的过程需经过有丝分裂和减数分裂。由于细胞中除了细胞膜以外，还有其他生物膜，所以测得的单分子层面积是大于D细胞表面积的2倍。
答案：(1)分裂和分化
基因
(2)对来自内质网的蛋白质进行加工、转运
(3)表达
(4)细胞核体积增大、染色质固缩、染色加深
(5)有丝分裂和减数
(6)是
因为D细胞内除了细胞膜以外，还有其他生物膜
24.(16分)宫颈癌是女性第二常见癌症，楚尔·豪森因发现HPV(人乳头瘤病毒)是导致宫颈癌的“罪魁祸首”的机理而获得2008年诺贝尔生理或医学奖。宫颈癌疫苗就是在此基础上开发出来的。请回答下列相关问题：
(1)由资料可知乳头瘤病毒是引起宫颈癌的
类致癌因子，该因子的作用是使正常细胞中的
由
状态转变成
状态，从而导致癌变的发生。
(2)对患宫颈癌的患者通常采用的治疗方法有“化疗”、手术切除和“放疗”，或相互结合综合治疗。请问，在切除肿瘤后，还要进行“化疗”的原因是
；“化疗”能够控制病情恶化，是因为化学药物抑制了肿瘤细胞分裂间期的
；达到
。
(3)根据资料介绍，结合动物细胞工程技术的相关知识，请你设计一个实验来探究“人乳头瘤病毒”对人体细胞染色体结构和数目的影响。
[1]该实验的原理是：若一种因子加入细胞培养液后，使培养细胞发生染色体结构和数目的变异，根据变异细胞占观察培养细胞的百分数，判断该因子的作用。
[2]实验方法步骤：
①材料准备：从医院妇产科获取所需要的原材料组织，“人乳头瘤病毒”液，高倍显微镜，培养瓶若干，配制好的培养液，剪刀，培养箱，所需要的酶。
②制备检测细胞：
a.配制细胞悬浮液：
。
b.将悬浮液分装到两个以上的培养瓶中，置于培养箱中培养一段时间。
③检测过程：
。
④实验结果观察、分析得出结论。
解析：癌细胞是由于正常细胞中的原癌基因受到致癌因子的刺激，由抑制状态转化成激活状态，导致细胞不能正常地完成细胞分化的结果。致癌因子通常包括物理致癌因子，如电离辐射、X射线等；化学致癌因子，如砷、苯、焦油等；生物致癌因子，如150多种病毒。根据癌变的机理，人们在治疗癌症时常采用化学疗法与物理疗法，它们的机理分别是阻止癌细胞的增殖及杀死癌细胞。癌细胞在增殖过程中，必须经过DNA的复制，因此化疗时常通过化学药物抑制或阻止癌细胞的DNA复制，某些药物还可干扰癌细胞中RNA与蛋白质的合成。在探究人乳头瘤病毒对人体细胞染色体结构和数目的影响时要注意单一变量原则和对照原则的应用，根据题干所给提示顺序做答即可。
答案：(1)病毒
原癌基因
抑制
激活
(2)癌细胞易扩散、转移
DNA复制
抑制肿瘤细胞分裂的目的
(3)[2]②a：将上述组织用剪刀剪碎，再用胰蛋白酶使其分散成单个细胞，然后利用培养液配制成一定浓度的细胞悬浮液
③检测：取两只培养瓶，标号为1、2，分别往其中加入等量配制好的培养液，再往1中滴加几滴“人乳头瘤病毒”液，往2中滴加等量的蒸馏水，摇匀。将步骤b某一个培养状况较好的培养瓶的细胞培养液分成两份，分别加入1、2培养瓶中，进行培养。一段时间后，分别从1、2培养瓶中取样做多次镜检，计算出变异细胞占观察培养细胞的百分数
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